Lái xe cứu thương được đào tạo chuyên nghiệp. Theo quy định của địa phương, xe cứu thương phải có nhân viên lái xe tận tâm có bằng lái xe phù hợp. Những người lái xe này phải có ít nhất ba năm kinh nghiệm lái xe và có lý lịch sạch sẽ về các vụ tai nạn lớn trong ba năm qua, chứng tỏ khả năng lái xe nhanh chóng và an toàn khi lưu thông đông đúc, vào ban đêm và trong điều kiện thời tiết bất lợi.
Chương trình đào tạo cũng bao gồm các kỹ năng như kiểm soát trượt và lái xe địa hình. Mặc dù tốc độ chắc chắn là quan trọng nhưng việc di chuyển êm ái là điều cần thiết khi vận chuyển bệnh nhân bị bệnh nặng hoặc bị thương nặng trong khi nhân viên y tế thực hiện chăm sóc khẩn cấp. Lái xe nhanh mà không lắc lư quá mức khi rẽ hoặc va chạm mạnh trên đường không bằng phẳng đòi hỏi kỹ năng lái xe đặc biệt và mức độ tập trung cao độ.
Các trung tâm dịch vụ y tế khẩn cấp tại địa phương tiến hành đào tạo an toàn thường xuyên cho người lái xe, bao gồm luật giao thông, nghiên cứu trường hợp các vụ tai nạn điển hình, các điểm an toàn chính khi lái xe khẩn cấp cũng như bảo trì và khắc phục sự cố phương tiện định kỳ. Hơn nữa, các buổi diễn tập kỹ năng, đào tạo bồi dưỡng và các cuộc thi hàng năm được tổ chức để đánh giá cả kiến thức lý thuyết (quy định giao thông và quy trình vận hành) và kỹ năng thực hành (kiểm tra phương tiện, xếp/dỡ cáng, lắp xích tuyết, thay lốp, hô hấp nhân tạo, v.v.), từ đó liên tục nâng cao năng lực tổng thể và khả năng ứng phó khẩn cấp của người lái xe.
Xe cứu thương thường được trang bị hệ thống lái trợ lực, thanh bảo vệ chống lật bổ sung và hệ thống treo sau được sửa đổi để đảm bảo chuyến đi suôn sẻ. Sức chứa hành khách thay đổi tùy theo loại phương tiện; ví dụ: xe cứu thương chăm sóc đặc biệt thường chứa ít nhất bảy người, trong khi xe cứu thương áp suất âm-có thể chứa ít nhất sáu người. Những cấu hình này bao gồm người lái, nhân viên y tế, người mang cáng và bệnh nhân; tuy nhiên, trong các tình huống tai nạn hoặc khẩn cấp, chỉ có một cáng được vận chuyển.
Dịch vụ xe cứu thương hiệu quả phải có khả năng đến hiện trường trong vòng 20 phút sau khi nhận được cuộc gọi khẩn cấp. Tuy nhiên, bất kể chất lượng đào tạo mà phi hành đoàn nhận được, việc đến nhanh thường là một thách thức-đặc biệt là trong bối cảnh giao thông đô thị tắc nghẽn hoặc ở các khu đô thị cũ, đổ nát, nơi có thể thiếu biển báo đường phố.
